第1章 動物個体への応用T
第1節 CRISPR/Cas9 システムを用いた自由自在なゲノム編集
(吉見一人,真下知士)
1. はじめに
2. ゲノム編集技術の発展
3. CRISPR/Cas9 によるノックアウト動物の作製
4. CRISPR/Cas9 によるノックイン動物の作製
5. 今後の展望
第2節 四倍体補完法を利用したCRISPR/Cas9 ゲノム改変マウス胚の解析
(天野孝紀,城石俊彦)
1. はじめに
2. ES 細胞におけるゲノム編集
3. テトラプロイド補完法
4. 展 望
第3節 ゲノム編集技術による疾患モデルマウスの作出 (宮田治彦,伊川正人)
1. はじめに
2. 疾患モデルマウス
3. CRISPR/Cas9 システムを用いたノックアウトマウスの作製
4. CRISPR/Cas9 システムを用いた点変異導入マウスや遺伝子挿入マウスの作製
5. まとめ
第4節 複数座位を標的としたゲノム改変マウスの作製:現状と課題
(藤井渉)
1. はじめに
2. 主要な人工ヌクレアーゼによる複数座位の改変
3. 複数座位の破壊の応用
4. 今後の課題と展望
第5節 CRISPR/Cas による遺伝子改変マウスの作製と疾患モデル多能性幹細胞への応用
(堀居拓郎,畑田出穂)
1. はじめに
2. Cas9 とsgRNA の準備
3. CRISPR/Cas による疾患モデル多能性幹細胞への応用
4. CRISPR/Cas による遺伝子改変マウスの作製
5. オフターゲット作用を回避するために
6. おわりに
第6節 ウサギにおけるゲノム編集 (本多新)
1. はじめに
2. ウサギのゲノム編集
3. Cas9 とgRNA を同時に含むプラスミドDNA の前核注入によるウサギ遺伝子破壊
4. ウサギゲノム編集における今後の課題
第7節 人工ヌクレアーゼを用いた遺伝子改変サルの作製 (佐々木えりか)
1. 非ヒト霊長類の実験動物
2. サル類における遺伝子改変技術
3. 今後の課題
第2章 動物個体への応用U
第1節 メダカにおけるゲノム編集 (木下政人)
1. はじめに
2. ゲノム編集ツール調製時の注意点
3. メダカへのゲノム編集ツールの導入方法
4. 標的ゲノムの変異検出方法
5. 遺伝子破壊メダカ系統の作製
6. 複数のゲノム編集ツールによる変異導入
7. 遺伝子挿入
8. 塩基置換
9. crRNA,tracrRNA,Cas9 タンパク質の利用
10. off-target の切断活性と対策
11. おわりに
第2節 ツメガエルにおけるゲノム編集 (坂根祐人,山本卓,鈴木賢一)
1. はじめに
2. 各ゲノム編集ツールにおける展開
3. ツメガエルにおけるゲノム編集の留意点―オフターゲット作用について
4. 総括と今後の展望
第3節 ゼブラフィッシュにおけるゲノム編集 (太田聡,川原敦雄)
1. はじめに
2. ゼブラフィッシュにおける遺伝子破壊
3. ゼブラフィッシュにおける外来遺伝子のノックイン
4. おわりに
第4節 フタホシコオロギにおけるゲノム編集 (渡辺崇人,松岡佑児,野地澄晴,三戸太郎)
1. はじめに
2. ZFN/TALEN を用いたコオロギ内在遺伝子への変異導入
3. CRISPR/Cas9 システムを用いたゲノム編集
4. おわりに
第5節 カイコにおけるゲノム編集 (坪田拓也,瀬筒秀樹)
1. はじめに
2. ZFN によるゲノム編集
3. TALEN によるゲノム編集
4. CRISPR/Cas9 によるゲノム編集
5. 新規ノックイン技術
6. 今後の展望
第6節 ホヤにおけるゲノム編集 (笹倉靖徳)
1. 脊索動物ホヤとは
2. カタユウレイボヤ・ゲノムへの外来DNA 挿入
3. カタユウレイボヤにおけるゲノム編集
4. 最近の研究紹介
5. おわりに
第3章 植物への応用
第1節 人工ヌクレアーゼを用いた植物の遺伝子変異導入技術への応用展開
(刑部祐里子,菅野茂夫,刑部敬史)
1. はじめに
2. ZFN,TALEN を用いた植物ゲノム編集
3. CRISPR/Cas9 を用いた植物ゲノム編集
4. 植物ゲノム編集の将来展開
第2節 人工ヌクレアーゼを用いた植物代謝工学 (安本周平,關光,村中俊哉)
1. 植物特化代謝産物とゲノム編集
2. ゲノム編集による植物代謝改変の実例
3. ゲノム編集による植物代謝改変の今後の展開
第3節 イネにおけるゲノム編集 (横井彩子,土岐精一)
1. はじめに
2. GT によるゲノム編集
3. 人工制限酵素を利用した標的変異技術によるゲノム編集
4. 高効率GT 技術の確立に向けて
5. 今後の展望
第4章 幹細胞・培養細胞への応用と治療法の開発
第1節 ヒトiPS 細胞におけるゲノム編集技術:その基本と応用
(北畠康司)
1. はじめに
2. ヒトES/iPS 細胞と3 つのゲノム編集技術
3. ヒトiPS 細胞でのゲノム編集の実際―遺伝子ノックアウト
4. ゲノム編集技術の応用―ダウン症候群における病態解析モデルの確立
5. 今後の展望
第2節 神経上皮パターニングの視覚化:相同組替え技術を基盤として
(高田望)
1. はじめに
2. 試験管内における立体神経組織の誘導
3. 人工ヌクレアーゼを用いたES 細胞のゲノム編集
4. おわりに
第3節 ゲノム編集のHIV への応用 (蝦名博貴,小柳義夫)
1. ウイルス感染症の治療法へのゲノム編集技術の注目
2. HIV 感染症の現状
3. HIV 治癒に向けた試み
4. ゲノム編集法によるエイズ治療戦略の現状
5. ゲノム編集法のHIV 感染症治療への応用の展望と課題
第4節 遺伝子改変技術を利用した新しいHCV 研究システムの開発
(福原崇介,松浦善治)
1. はじめに
2. C 型肝炎の臨床病態とその治療
3. HCV の感染環
4. HCV の同定とHCV 感染培養系の開発
5. HCV 研究の問題点
6. 相反する結果が報告されているHCV 関連宿主因子
7. アポリポタンパク質のHCV 感染における役割
8. ノックアウトHuh7 細胞の樹立とその細胞に対するHCV 感染実験
9. HCV 研究における遺伝子改変技術を用いた今後の展開
10. おわりに
第5節 遺伝性疾患患者のiPS 細胞を用いた遺伝子修復治療への課題
(草野好司,朱亜峰)
1. 遺伝子修復治療の意義と目標
2. 遺伝子対ヘテロ接合性の喪失の危険性
3. 遺伝子修復型遺伝子治療の基盤機構
4. 人工ヌクレアーゼによる点変異・欠失・挿入型遺伝性疾患の治療
5. 人工ヌクレアーゼが標的遺伝子座だけを認識しドナーDNA を認識しない遺伝子修復
6. DNA 二本鎖切断修復機構に帰する医療事故(患者細胞のゲノム破壊)とその回避法
7. 遺伝子治療費の高額化回避への貢献
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